今時(shí)我們來(lái)聊一聊 液相色譜的冷門檢測(cè)器 都有哪些!冷門,說(shuō)明不能通用,因?yàn)樗麄儗?duì)于分析某些類型的樣品有非常好的效果,但可惜的是,這些樣品的種類不多,或者應(yīng)用的行業(yè)十分局限,所以這類檢測(cè)器也就很難在茫茫應(yīng)用中大顯身手了,只有遇到正好相克的對(duì)手,才能輕松取勝。檢測(cè)器中的熒光檢測(cè)器,電導(dǎo)檢測(cè)器等等就屬于這類儀器。
RID,簡(jiǎn)稱示差,這是液相檢測(cè)器中非常令人唏噓感慨的一個(gè),本來(lái)它是非常早期商品化的液相色譜檢測(cè)器,可是現(xiàn)在淪落到只能偏居各類檢測(cè)器的一隅,滄海桑田的變化,令人感慨萬(wàn)分。
由于這類檢測(cè)器是檢測(cè)經(jīng)過流通池的液體的折光率的變化而產(chǎn)生響應(yīng)的,所以具有很好的通用性,因?yàn)楸环治鑫锶芙庠诹鲃?dòng)相中以后,一定會(huì)改變流動(dòng)相的折光率,所以示差檢測(cè)器可以對(duì)所有能進(jìn)行液相分析的樣品產(chǎn)生響應(yīng),在過去的年代,大家對(duì)分析的要求還很低,不要求靈敏度,不要求分析速度,在加上示差的這種通用性,讓他當(dāng)之無(wú)愧的成為了風(fēng)靡一時(shí)的通用型檢測(cè)器。
不過,隨著技術(shù)進(jìn)步,大家對(duì)分析的要求越來(lái)越高,速度,靈敏度上都有了更嚴(yán)格的要求,RID的弱點(diǎn)就日益凸顯出來(lái)了:靈敏度低,通常示差檢測(cè)器能分析的樣品濃度都是在幾個(gè)mg/mL以上的,這對(duì)于現(xiàn)在的分析要求來(lái)講,實(shí)在是差的太遠(yuǎn)了;無(wú)法運(yùn)行梯度方法,示差檢測(cè)器靠得是檢測(cè)流動(dòng)相折射率的變化進(jìn)行檢測(cè),如果流動(dòng)相自己的折射率都一直在變化,示差就無(wú)法正常工作,梯度方法由于其中不同流動(dòng)相的比例在不停變化,折射率也在不停變化,這就讓示差檢測(cè)器無(wú)法正常工作了。
也是由于這個(gè)原因,示差檢測(cè)器在使用的時(shí)候,通常要平衡非常久,保證流動(dòng)相均勻穩(wěn)定之后,才能開始分析。另外,一切會(huì)影響折射率的因素:溫度的變化,混合的均勻性,氣泡等等對(duì)于示差來(lái)講都是致命的。
再加上新檢測(cè)的不斷涌現(xiàn),示差曾經(jīng)的江湖大佬地位逐漸萎縮,不過,幸運(yùn)的是,它還沒有*消亡,由于價(jià)格便宜,一些經(jīng)典的應(yīng)用分析大家還是會(huì)選擇示差,比如糖的分析(當(dāng)然是在不追求靈敏度的情況下)。
熒光檢測(cè)器(FLD),它的經(jīng)歷遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有示差檢測(cè)器那么曲折復(fù)雜令人唏噓,因?yàn)?,它天生就是被設(shè)計(jì)用來(lái)測(cè)定具有熒光響應(yīng)的化合物的。
我們可以看看熒光檢測(cè)器的優(yōu)勢(shì):
專屬性:由于具有熒光響應(yīng)的物質(zhì)種類不多,所以,熒光檢測(cè)器的專屬性非常好,只對(duì)有熒光特性的物質(zhì)才產(chǎn)生響應(yīng),其他一概不管,大程度的減小了干擾。通常,多環(huán)芳烴這種含有超大共軛體系的化合物都是具有熒光響應(yīng)的物質(zhì)。
靈敏度:熒光檢測(cè)器的靈敏度非常高,很多情況下,其在靈敏度上的表現(xiàn)堪比質(zhì)譜檢測(cè)器,這是由于熒光檢測(cè)器是屬于發(fā)射光檢測(cè)器,不同于紫外這類吸收光型檢測(cè)器,由于不受到樣品溶液本身等因素的影響,即使有很微量的光發(fā)射出來(lái),也可以很好的被檢測(cè)。
除了上面兩個(gè)大優(yōu)勢(shì)之外,熒光檢測(cè)器在線性,流動(dòng)相兼容性(只要避免一些有熒光淬滅效應(yīng)的試劑就可以)以及采樣頻率上也都有不錯(cuò)的表現(xiàn)。
熒光檢測(cè)器的雖然性能犀利,但是由于鉆了牛角尖,注定也只能做個(gè)檢測(cè)器中的小配角了:
主要的原因就在于,液相測(cè)定的應(yīng)用里有熒光響應(yīng)的東西,實(shí)在是太少了…連5%都占不到,算上大家為了利用熒光檢測(cè)器的優(yōu)勢(shì)將樣品衍生為有熒光響應(yīng)的物質(zhì),也大概勉強(qiáng)就能占到10%吧。
這類檢測(cè)器更加冷門了,只對(duì)能產(chǎn)生“電”特定的物質(zhì)才有響應(yīng),要不物質(zhì)本身具有氧化還原特性,要不就是它自己本身就是個(gè)離子,其實(shí),要是細(xì)算下來(lái),液相能分析的化合物中,有著兩類特性的東西也不算很少,至少,不比有熒光的化合物少,不過,絕大部分這些“電性”化合物都可以用紫外/可見檢測(cè)器來(lái)測(cè)定,再加上電性檢測(cè)器的價(jià)格也不算便宜,所以,大部分的化合物,大家還都是用紫外/可見檢測(cè)器來(lái)測(cè)定,只有一些個(gè)別的種類大家才會(huì)考慮使用這種檢測(cè)器。
至于優(yōu)勢(shì),其實(shí)這類檢測(cè)器在靈敏度上的表現(xiàn)是很不錯(cuò)的,線性也很不錯(cuò),但是在專屬性上,就要差一些了,其實(shí)我們剛才也說(shuō)過,很多的東西(尤其在很多復(fù)雜的生物樣品中)是具有氧化還原特性的,所以他們會(huì)對(duì)這類檢測(cè)器造成一定干擾,使它在性能上打上一些折扣。
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